




大肠检测:
气相色谱法主要是将大肠经过一系列衍生化的前处理后,为接下来的分析研究提供尽可能多的化学组分。大肠的污染程度可以用顶空气相色谱法来分析,其原理是利用食品密封系统顶部的微生物代谢产物co2对微生物进行分析。这种方法对食品安全检测有重大意义。与上述传统技术相比,此种方法具有检测速度快、灵敏度高的优点。
gao效液相色谱法(hplc)主要是根据离子配对反相层析的原理来分析---。在长链dna所携带的磷酸基团比较多,因此会有更多的teaa与之相融合,其在柱内停留的时间增加。因为yi腈具有亲水性,可以通过其而将dna分离,在具备一定的变性温度下,可以通过图谱显示明显的吸收峰。该技术具有准确度高、灵敏度高、成本低等优点,可---提高工作效率。
平板计数法
大肠平板计数法检测分为两个阶段。在初培养中,选取2~3 个适宜的连续稀释度, 每个稀释度接种2个无菌平皿,总大肠检测系统,每皿接种1ml。同时取1ml生理盐水加入另外的无菌平皿作阴性对照。迅速将 15ml~20ml冷却至 46℃的结晶紫中性红胆盐琼脂(vrba)加入每个平皿中。小心地旋转平皿,成都总大肠检测,使培养基与样液充分混匀,等到琼脂凝固以后,再加入3ml~4mlvrba 覆盖平板表层。翻转平板铺匀后,放在 36(℃±1)℃培养18~24h。平板菌落数按照以下方法选择:选取菌落数在 15cfu~150cfu之间的平板,分别计数平板上出现的典型和的大肠菌群菌落。典型菌落呈现紫红色,并且菌落周围有红色的胆盐沉淀环,总大肠检测仪,菌落直径为 不小于0.5mm。证实试验为:从vrba平板上挑取10 个不同类型的典型和菌落,分别移种到bglb肉汤管内,(36℃±1)℃培养24~48h,观察产气情况。凡是bglb肉汤管产气,就可以报告是大肠菌群阳性。证实是大肠菌群阳性的试管比例乘以以上步骤中计数的平板菌落数总数,再乘以稀释倍数,就是每g(ml)样品中大肠菌群数。
大肠菌群平板计数法操作起来比较简便,带有菌落的平板可以直接计数,还可以观察菌落特征,可见的菌落与大肠菌群量可以直接对应,便于得出定量结果,这种方法的缺点是因为大肠菌群在平板上很小,所以肉眼有时难以观察,需要用放大镜仔细辨认。验证实验需要挑选菌落,因此受人主观的影响很大,如果没有挑对或挑取的数量不够多都可能导致假阴性结果[3]。
酶底物法 ( enzyme substrate technique)的原理是 :利用大肠菌群---能产生β2半乳糖苷酶 (β2d2galactosidase)分解 on 2pg (o rtho2 nitrophenyl2β2d2galactopyranoside ) 使培养液呈黄色 ,检测水样中是否含有大肠菌群。利用大肠埃希菌产生 β2葡萄 糖 醛 酸 酶 ( β2glucuronidase ) 分 解 mug ( 42 methyl2umbelliferyl2β2d2glucuronide)使培养液在波长 366 nm紫外光下产生蓝色荧光 , 检测水样中是否含有大肠埃希菌。酶底物法有商品化试剂供应 ,实验操作简便 ,无需确认试验 ,可同时检测水样中大肠菌群和大肠埃希菌。如果改变培养温度 ,还可检测耐热大肠菌群。该方法检测周期短 , 18 ~24 h 即可报告结果。可见该方法较大的特点是节省了时间和人力。
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