酶底物法检测工作原理酶底物法使用onpg和mug两种营养生长指示剂,其中onpg试剂在36℃的培养基中会被总大肠菌群产生的特---β-半乳糖苷酶分解代谢,使水样从无色变为黄色,在44.5℃的培养基中会被粪大肠菌群(耐热大肠菌群)产生的特---β-半乳糖苷酶分解代谢,使水样从无色变为黄色,mug试剂在36℃的培养基中会被大肠埃希氏菌产生的特---β-葡糖---酶分解代谢,使水样在紫外灯下发出荧光,从而实现水质大肠菌群的检测。
每批试剂需做验证检验:向一份100ml无菌水样中接种含有粪大肠菌的质控样标准菌株,按照上述定量检测步骤操作观察结果,看结果是否在其范围内。
9 注意事项
9.1 如果水样品有背景颜色,程控定量封口机供应商,需做一个空白试验,与标准检测结果相比较。
9.2 只可使用灭菌水,不含缓冲液的水,程控定量封口机报价,不含氧化剂的水进行样品稀释。
9.3 此法所用试剂只用于常规水样,不可用于浓缩水样。
9.4 如水样中含有过多的氯,则加入试剂可能显蓝光,则该水样不可用此方法。
9.5 此法无需在无菌室中进行,但操作过程因避免微生物污染。
9.6 检测使用过的定量盘应灭菌后弃去。把约30个定量盘放入防爆袋中,用绳子松松的扎住袋口,放入高压蒸汽灭菌锅中,121℃高压灭菌20min后取出,在防爆袋上注明“生物垃圾已灭菌”方可弃去。
水质大肠菌群酶底物法检测系统:由lk-2010国产程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100ml定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、用水等。初发酵试验1、水样稀释:制备水样10-1、10-2的稀释液,方法为用无菌移液管吸取水样10ml放于盛有90ml无菌水和若干玻璃珠的锥形瓶中,充分振荡使混合均匀,并使其中的---尽量呈单个存在,即为10-1稀释液;再从10-1制备10-2稀释液。以此类推,稀释到所需倍数。2、接种和培养:以无菌操作于5支三倍浓缩培养基(接种---定应先检查杜汉氏小管内有无气泡)中各加入水样10ml,山东程控定量封口机,5支普通培养基试管中加入水样1ml,5支普通培养基试管中加入10-1稀释液1ml, 小心混匀放入37℃培养箱中培养24h 。此即5管法。3、结果观察:37℃中培养24h后取出观察,观察有无气体(杜汉氏小管内有无气体)和酸产生(培养基有无变色)。在48h之间,程控定量封口机销售,培养管内倒置的杜汉氏小管内有任何量的气体积累,或培养基颜色从紫色变为黄色,便可初步断定为阳性反应。
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